简介:4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种重要的氢离子缓冲剂,其在pH为6.8~8.2的范围内具有良好的缓冲能力,能较长时间控制恒定的pH。使用浓度为10~50mmol/L,一般培养液内含20mmol/L4-羟乙基哌嗪乙磺酸即可具有良好的缓冲能力,且对细胞无毒性作用。
使用方法:(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,好终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.
应用:HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)是一种非离子两性缓冲液,具有高度极性,对多种化学试剂和酶呈惰性,不参加和不干扰生物化学反应的过程,对酶化学反应等无抑制作用,因此可专门用于对细胞器和极易变性的、pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。
用途:用作生化试剂
用途:生物缓冲剂;分离与分析RNA核组分的反应缓冲液、预杂交缓冲液、杂交缓冲液;用于RNA与T4RNA
用途:分子生物学级用于用T4RNA连接酶进行RNA3'-末端标记,分离与分析核RNA之反应缓冲液组分、预杂交缓冲液缓和杂交缓冲液成分
用途:细胞-细胞黏附,细胞短期聚集培养,清洗组织、细胞所用缓冲液